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PCR實驗室分區及各分區主要功能作用

PCR實驗室有哪些分區?PCR實驗室的各個分區的功能是什么?PCR實驗室原則上分成四個區:試劑準備區、樣品制備區、擴增區、擴增產物分析區。每個獨立實驗區設置有緩沖區,同時各區通過氣壓調節,使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產物對人員和環境的污染。

PCR實驗室分區
PCR實驗室分區設計

一、PCR實驗室的四個分區

1、試劑準備區。此區主要是進行試劑的制備,分裝和主反應混合液的制備。試劑盒用于樣品制作的材料應直接運送至該區域。試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的試劑。試劑準備區主要設備有天平、冰箱、離心機、加樣器、振蕩器等。對于,試劑準備區對氣流壓力的控制并沒有嚴格要求,通常在+10Pa。

2、樣品制備區。此區主要進行樣品的保存,核酸提取,貯存及期入至擴增反應管和測定DNA的合成。樣品制備區主要設備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器等。樣品制備區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為正壓,以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染, 一般為+10Pa。

3、擴增區。此區主要進行DNA的擴增。另外,已制備的DNA模板的加入和主反應混合液(來自試劑準備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。擴增區主要設備有:擴增儀、冰箱、離心機、加樣器等。擴增區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為負壓,為避免氣溶從本區漏出,一般為-25Pa。

4、擴增產物分析區。此區主要進行擴增產物的測定。擴增產物分析區主要設備有酶標儀、洗板機、加樣器和水浴箱等。擴增產物分析區的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區域為負壓,一般為-25Pa,以避免擴增產物從本區擴散至其它區域。

二、PCR實驗室防護消毒

1、實驗室空氣消毒:實驗室每次檢測完畢后,需要進行空間消毒,清除實驗室殘留的核酸。

2、工作臺面消毒:每天實驗后使用消毒液進行臺面、地面消毒。包括垃圾桶及垃圾袋都需要噴灑專用消毒液,確保病毒被殺滅。

3、安全柜消毒:每天實驗完成后,對生物安全柜進行擦拭消毒。

4、轉運容器消毒:轉運及存放標本的容器,使用前后用消毒劑噴灑消毒。

5、塑料或有機玻璃材質消毒:使用過氧乙酸或過氧化氫噴霧(噴淋)消毒,或擦拭消毒。

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