PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復制。其特點是能將微量的DNA大幅增加,是分子生物學研究和實驗的常規方法,PCR實驗室廣泛應用于生物學各個領域。
PCR實驗室主要實驗項目:
艾滋病檢測,乙型肝炎,禽疫病,癌基因的檢測和診斷,DNA指紋,個體識別,親子鑒定及法醫物證等等。
PCR實驗室建設標準
一、PCR實驗室平面布局
PCR實驗室原則上分為4個單獨的工作區域,由擴增前區到擴增后區,且要嚴格分開。實驗材料、試劑、記錄筆、紙、清潔材料等,只能從擴增前區流向擴增后區,即從試劑制備區–樣品制備區—擴增區—擴增產物分析區,不得逆向流動。實驗室的氣流也應從擴增前區流動到擴增后區,不得逆向流動。
各工作區域應設置緩沖間,工作間與緩沖間之間宜安裝聯鎖裝置。不同功能的核酸檢驗工作區應是分隔獨立的工作室,并有明顯的標志,各區間不能直通。各區之間如果是緊密相連,需安裝物品 傳遞窗。每個工作區域的頂部應安裝紫外燈,紫外燈的波長為254nm。
實驗室較為理想的布局模式為有一個專用走廊,試劑制備區,樣品制備區,擴增區和產物分析區很規范的排列在一起。內實驗室區域設為正壓或常壓狀態,緩沖間內設為負壓狀態,使這三個區的空氣流向由實驗區域內向外,緩沖間內通向內實驗室和走廊的門可安一種聯鎖裝置,當一個門打開時,另一門必須關閉狀態,防止出現兩個門同時打開的情況。
二、各區的功能及主要設備
試劑制備區主要是擴增試劑的配制,分裝盒保存。主要設備有天平、冰箱、離心機、加樣器、紫外燈。
樣品制備區主要是樣品的混樣和測試樣品的制備。主要設備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴、上下水設備、廢棄物容器、紫外燈。根據制備樣品的性質和要求決定操作臺是用生物安全柜、凈化工作臺、還是排毒柜,如疾控中心、臨床醫學實驗室一般選用生物安全柜,植物轉基因、檢疫等可選排毒柜。
擴增區是pcr擴增反應體系的配制和模板的加入,核酸擴增。加樣應在生物安全柜(超凈工作臺)內進行,超凈工作臺的氣流方向宜選擇垂直式。核酸擴增設備為冰箱、生物安全柜、離心機加樣器、廢棄物容器、紫外燈。
擴增產物分析區是擴增產物的測定。若實驗僅采用全自動擴增檢測儀,可將 區與擴增產物分析區合并為一個區。本區所使用的儀器設備有酶標儀、洗板機、加樣器和水浴箱等。
三、實驗室空調通風系統設計及壓力控制
各個區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗室之間的相互干擾,防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產生假性結果。PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為了避免各個實驗區域間交叉污染的可能性,宜采用全送排的氣流組織形式。
四、PCR實驗室裝修
實驗室的墻體,包括頂棚,應結構牢固、氣密性好;所有陰角宜采用弧形線條過濾;
墻體內壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;
地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。地面建議使用PVC卷材地面或自流平地面,整體性好,便于進行清掃,耐腐蝕。
pcr實驗室建設中容易出現的問題:
1、PCR實驗室的空氣流向必須嚴格按照試劑儲存和準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物分析區空氣壓力逐漸遞減方式進行,防止擴增產物順空氣氣流進入擴增前的區域。需要嚴格的通風設計,若通風設計不合理,會使風速流向混亂,甚至危害人們健康。
2、人流路徑與物流路徑設計不合理
進入實驗室區域工作人員應該按照以下路徑:
公共清潔區——更衣間(更換潔凈服)——緩沖間——污染實驗區
工作人員退出實驗室的路徑為:
污染試驗區——緩沖間——淋浴間(有條件的可設置)——更衣間——公共清潔區
深圳華安提供專業的PCR實驗室建設解決方案:
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